| 下图(一)为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素(抗生素)抗性基因，tctR为四环素(抗生素)抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题： |
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| (1)在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的_________酶；二是将目的基因与运载体拼接的_________酶；三是作为运载体的质粒。 (2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体(质粒)进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“____________”、“____________”、“___________”三种，其中有效的(所需要的)基因表达载体是____________，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。 (3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的3种拼接产物(基因表达载体)与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(基因表达载体)是_______。 (4)有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图(一)中的________。在动物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是________。在植物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是_________。是因为这种微生物很容易侵染到_________中，从而把它的Ti质粒上的_________转移到受体细胞染色体的DNA上。 (5)在基因工程中，作用于图(二)所示a位置的酶是____________；作用于b位置的酶是____________。 |
